二苯并環(huán)辛炔-生物素的特點(diǎn)有哪些
2026-02-02
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二苯并環(huán)辛炔-生物素(DBCO-生物素)結(jié)合了點(diǎn)擊化學(xué)與生物素-親和素系統(tǒng)的雙重優(yōu)勢(shì),具有以下核心特點(diǎn):
1. 高效的點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)活性
無(wú)銅催化反應(yīng):DBCO基團(tuán)能與疊氮基團(tuán)(如疊氮修飾的抗體、核酸、蛋白質(zhì))通過(guò)無(wú)銅點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)(SPAAC)快速結(jié)合,生成穩(wěn)定的三唑環(huán)結(jié)構(gòu)。該反應(yīng)無(wú)需金屬催化劑,條件溫和(pH 6-8、4-37℃),副反應(yīng)少,特別適合活細(xì)胞或體內(nèi)體系的生物分子修飾。
高反應(yīng)效率:反應(yīng)速率快,可在數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí)內(nèi)完成,且對(duì)生物分子的活性和功能影響極小,保持目標(biāo)分子的天然結(jié)構(gòu)。
2. 強(qiáng)特異性的生物素-親和素結(jié)合
超高親和力:生物素與鏈霉親和素(或親和素)的結(jié)合常數(shù)(Kd)低至10?1? mol/L,形成的復(fù)合物穩(wěn)定性較強(qiáng),專一性好,是生物分子識(shí)別領(lǐng)域的“黃金標(biāo)準(zhǔn)"。
模塊化設(shè)計(jì):通過(guò)DBCO與疊氮基團(tuán)反應(yīng)引入生物素后,可利用生物素-親和素系統(tǒng)將目標(biāo)分子與其他物質(zhì)(如熒光標(biāo)記物、酶、納米顆粒)偶聯(lián),實(shí)現(xiàn)信號(hào)放大或功能拓展。
3. 良好的生物相容性與水溶性
柔性連接臂:若DBCO與生物素通過(guò)聚乙二醇(PEG)鏈連接,PEG的氧乙烯重復(fù)單元可與水分子形成氫鍵,顯著增強(qiáng)水溶性,降低非特異性吸附,減少免疫原性,適合生物體系應(yīng)用。
化學(xué)穩(wěn)定性:在常見(jiàn)緩沖液(如PBS、Tris-HCl)及生理?xiàng)l件下不易降解,對(duì)光、氧耐受性較好,便于儲(chǔ)存與實(shí)驗(yàn)操作。
4. 多功能應(yīng)用場(chǎng)景
生物分子標(biāo)記與檢測(cè):
蛋白質(zhì)工程:標(biāo)記特定蛋白質(zhì)后,通過(guò)鏈霉親和素包被的磁珠進(jìn)行富集,結(jié)合質(zhì)譜技術(shù)實(shí)現(xiàn)低豐度蛋白的精準(zhǔn)鑒定。
核酸研究:標(biāo)記寡核苷酸探針,結(jié)合鏈霉親和素介導(dǎo)的信號(hào)放大,提升核酸雜交檢測(cè)效率。
免疫分析:構(gòu)建雙標(biāo)記檢測(cè)體系(如熒光成像),通過(guò)DBCO與疊氮標(biāo)記的抗體結(jié)合,再利用生物素與熒光素標(biāo)記的鏈霉親和素結(jié)合,實(shí)現(xiàn)靶抗原的高靈敏度檢測(cè)。
活體成像與動(dòng)態(tài)追蹤:
在活體動(dòng)物模型中,對(duì)靶標(biāo)組織或細(xì)胞進(jìn)行疊氮修飾后,注射DBCO-生物素,通過(guò)點(diǎn)擊反應(yīng)實(shí)現(xiàn)生物素在靶標(biāo)部位的富集,結(jié)合熒光/放射性標(biāo)記的鏈霉親和素進(jìn)行活體成像。
藥物遞送系統(tǒng):
修飾納米載體表面,通過(guò)DBCO與疊氮修飾的細(xì)胞靶向配體(如抗體、多肽)結(jié)合,提高載體對(duì)病變細(xì)胞的靶向性。
利用生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)載體的可控釋放,提升藥物療效并減少毒副作用。
納米材料功能化:
在納米顆粒表面引入DBCO-生物素,實(shí)現(xiàn)可控分子修飾和功能化(如制備生物傳感器、組織工程支架)。
5. 操作便捷性與靈活性
溶解性:溶于大部分有機(jī)溶劑(如DMSO、DMF、DCM),部分產(chǎn)品因含PEG鏈而具有良好的水溶性,適應(yīng)不同實(shí)驗(yàn)需求。
儲(chǔ)存條件:建議低溫(-20℃)避光干燥保存,防止分子降解,操作過(guò)程中避免強(qiáng)光和高溫環(huán)境。
規(guī)格多樣:提供瓶裝形式,常規(guī)包裝規(guī)格包括100 mg、250 mg和500 mg,亦可根據(jù)需求定制,滿足不同實(shí)驗(yàn)規(guī)模。
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